人体微生物组成包括各种器官、内部微生物群落以及细菌和致病真菌的组合。微生物的数量（3800百万）超过微生物的数量（3000万）¹，²。撇开直接构成健康问题的微生物不谈，微生物群落的存在也与人体系统直接相关。然而，近年来，随着研究技术的进步，从最初的人体研究到针对人体特定器官的研究，微生物的研究也取得了长足的进步。人造人体部分地模拟了人体（大型人体），其主要来源是体内的微生物。微生物的发展在过去几年中发生了变化，有益过程的发展成为可能（以下简称食物化合物分解）⁴，⁵，但也可能存在潜在危害（菌群失衡导致不同的疾病症状或直接引起感染），以及导致特定微生物类型/一定程度组合的危害⁴，⁵。
早期研究报告显示，易吸收化合物，如蔗糖、高果糖和日本乳糖，进入体内后无需消化，因为它位于小檗碱的上部，能够被快速吸收⁶。然而，它是一种含水化合物，易于在胃中消化，具有在胃中易于消化的能力。此外，短链脂肪酸无需发酵即可被微生物发酵，而短链脂肪酸在人体中具有重要的来源，并且对中国的一些慢性疾病（包括某些轻微癌症和各种疾病）也有重要影响。因此，脂肪酸的循环减少，导致体内pH值降低，从而限制了体内活微生物的数量，并抑制了某些有害细菌的生长。
健康有益的微生物，包括综合性细菌、瘤胃球菌、黏液菌、厚壁菌、消化球菌、乳酸杆菌等，能够在低温环境下长期存活，并以多种方式生存。通透膜（免疫激活和抗菌蛋白产生的主要场所）阻止有害细菌通过饮用水、食物、污染水源或进入食物，是人体的重要屏障。
食物链中微生物的组成对食物链中微生物的组成有直接影响。然而，目前微生物对人类饮食的影响主要体现在人类的消费上，而各种直接影响因素包括我们的出生、出生方式、健康状况以及每个人的饮食习惯。富贵果、果汁、菊花花粉、水果、健脾粉、日本水果食品品质、水果、蔬菜、豆类、全谷产品（白芸豆、燕豆、小米和大麦）对您的健康非常重要，富含有益的活菌、食物因子及其刺激作用，具有特殊的意义⁶,¹²。然而，有益微生物食品、完全发酵食品和其他活性微生物，如有效牛肉、泡沫蔬菜、天蛤、功夫茶、泡沫蔬菜、味噌和日本酸菜等，一直在不断改良。
育龄妇女（WRA）是一个特殊群体，这意味着她们对孩子的需求很高¹⁵。妇女，尤其是生活在贫困地区的妇女，健康状况较差，这也是她们健康问题的原因之一。因此，我们为妇女群体提供丰富的食物、均衡的饮食，帮助改善儿童的健康状况，并提供较高的社会福利和组织福利。然而，在条件各异的社会中，满足妇女日常生活的具体需求至关重要。妇女，尤其是生活在贫困地区的妇女，健康状况较差，这也是她们健康问题的原因之一。小米饮料“德乐”的基地发酵牛肉现已抵达越州南部，并为当地居民提供了便捷的购买途径。该产品通常被称为“布基捆扎法”或“布基捆扎法”。当然，信使的高品质产品会受到尊重，但贫困人口可能无法得到满足。此外，其他产品不适合乳糖不耐受人群。我已发表过自己的研究，指出大豆（一种品种丰富、蛋白质含量低、脂肪含量低的大豆）可以作为奶牛的替代品，而且大豆中富含有益的雌性微生物。我们计划使大豆制品（SMB）发酵蔬菜产品更加方便、安全、有益于消费者。此外，随着大豆市场的增长，畜牧养殖比例的提高，大豆消费量增加，环境影响降低，大豆市场的发展得到了促进，当地农民的生活水平也得到了提高。
方法
研究领域
本研究在迦納沃爾特地區的霍霍埃市（HMV/GH）進行。 根據迦納共和國財政部2024年報告：HMV/GH人口規模為114,472（2021年人口住房普查數據），其中男性54,893人（48%），女性59,579人（52%）。 與區域平均水準（每平方公里175人）相比，HMV/GH人口密度高（每平方公里312.3人），約73%的人口居住在城市地區，27%居住在農村地區。 該市平均家庭規模為3.1人，低於區域平均值3.3人和全國平均值3.6人。
倫理批准
研究方案和方法經迦納衛生服務倫理審查委員會（GHS-ERC 015/10/21）、科學與工業研究委員會機構審查委員會（CSIR/IRB/AL/VOL 1-017）和健康與 allied 科學大學研究倫理委員會（UHAS-REC A7 （2） 2t-22）審查和批准，以確保結果的完整性和保護參與者，符合《赫爾辛基宣言》。
納入和排除標準
納入15-49歲的育齡婦女，無論是否懷孕或哺乳，而年齡<15歲的女孩和年齡>49歲的婦女被排除在外。 在研究開始前至少一個月內服用抗生素或服用維生素礦物質補充劑的婦女也被排除在研究之外。
知情同意和參與者招募
在招募前，向所有願意參與的育齡婦女獲得知情同意（向所有育齡婦女宣讀，識字者簽名，不識字者按手印）。 對於18歲以下的婦女，在入組前還需獲得其本人同意以及法定監護人或父母的同意。 使用半結構化問卷收集招募的育齡婦女的人口統計學資訊。 本研究招募了40名參與者，包括10名哺乳母親、10名孕婦和20名非孕婦非哺乳（NPNL）婦女（表1）。 招募的育齡婦女被分為兩個飲食佇列，分別餵食大豆奶-布吉納（SMB）（5名哺乳母親、5名孕婦和10名既不懷孕也不哺乳的婦女）或大豆奶-小米混合飲料（5名哺乳婦女、5名孕婦和10名NPNL）。
大豆奶-布吉納（SMB）和大豆奶-小米混合飲料（SMMB）的生產
SMB和SMMB的製備原料包括大豆、珍珠小米、糖和適量鹽。 生產包括四個不同階段：大豆奶生產、大豆奶發酵成優酪乳（用於SMB）、小米粉蒸煮以及將蒸煮后的小米粉與新鮮大豆奶或大豆優酪乳混合（補充圖1）。
大豆奶生產
大豆奶使用內部定製程序生產。 簡而言之，2千克整粒大豆在室溫（28°C）下用飲用水浸泡8小時。 隨後用電動研磨機將大豆與6升水一起研磨成糊狀。 再加入8升水，持續攪拌形成漿液。 然後將漿液在壓力鍋中以110°C和1巴壓力煮15分鐘。 過濾煮熟的漿液以提取12-15升大豆奶。 每升大豆奶添加45克糖和1克鹽以改善口感。 然後添加香草調味。 使用折射儀評估白利糖度，確保每輪生產的大豆奶具有最佳一致性。
大豆優酪乳生產
大豆優酪乳的製備方法與牛奶優酪乳基本相似。 從AECI食品與飲料公司（AECI Limited的子公司）採購了優酪乳 starter culture（YC-380，版本：5 PI EU EN 11-11-2019）。 以每升大豆奶0.1克的比例添加starter culture，並加熱至45°C並充分混合。 接種后的大豆奶在預設溫度45°C下培養8小時，製成“可飲用”的大豆優酪乳。
蒸小米凝集物生產
1千克小米洗凈並浸泡8小時。 然後瀝干、沖洗並研磨成粗粉。 將粗粉灑上水，用手掌揉搓形成生凝集物。 在中火上煮沸2升新鮮水。 將生凝集物加入沸水中，持續攪拌20分鐘，直至達到結塊和粘稠的質地。 將結塊的小米（蒸凝集物）從沸水中取出，在室溫下冷卻。
SMB和SMMB的配製喚醒慾望女士催情 一夜傾心迷幻藥 再次悸動治療性冷感 堅持到底男士持久 快速起效男士助勃 掌控時間延時噴霧 淫蕩春藥水 自然加碼陰莖增大 草本配方補腎壯陽 點燃欲火男士催情
將1升大豆優酪乳測量到混合碗中。 加入600克蒸小米凝集物，用叉子搗碎結塊，然後舀入含有大豆優酪乳的混合碗中。 使用氣球攪拌器將大豆優酪乳和蒸小米碎屑充分混合，直至碎屑均勻分散在整個優酪乳中，形成SMB。 SMMB的配製遵循相同程式，用未發酵的大豆奶替代大豆優酪乳。 生產的SMB和SMMB在5°C下冷藏，直到準備食用。
參與者餵養和糞便樣本收集
這項單盲集群隨機對照試驗於2022年9月至11月進行。 集群是接收SMB或未發酵產品（稱為大豆奶-小米混合飲料，SMMB）的不同社區。 每名育齡婦女在直接觀察下每天餵食300毫升SMB或SMMB，持續八周，以確保依從性。 使用OMNIgene-gut（OM-200）樣本收集套件在基線（干預前第0周）、干預期間（第6周和第8周）和終點（干預后第10周和第12周）收集糞便樣本，並在-80°C下儲存，直到準備進行DNA提取和巨集基因組研究。 我們選擇這些干預前、干預中和干預后研究設計，以確保在干預前有明確的基線資訊，檢測干預的潛在影響，並檢測干預的影響是短暫的還是持續存在的。
糞便樣本DNA提取用於巨集基因組分析
在無菌條件下，讓冷凍樣本在室溫下解凍，然後使用DNeasy PowerSoil® Pro試劑盒（Qiagen，Hilden，德國）根據製造商的協議進行DNA提取。 簡而言之，將約1000 μL的每種液化糞便樣本添加到含有裂解緩衝液的Power Bead Pro管中，並在Bead Genie bead beater（Scientific Industries Inc.，紐約，美國）中以最大速度機械均質化5分鐘。 去除抑製劑后，DNA結合到固體介面進行洗滌。 然後洗脫純DNA，並使用NanoDrop 2000分光光度計（Thermo Scientific，Waltham，馬薩諸塞州）檢查其品質。 DNA樣本在-80°C下儲存，直到作為60 μL等分試樣在密封的96孔板中運送到美國明尼蘇達大學基因組中心（UMGC），用於16S rRNA V3/V4區域文庫製備和使用Illumina平臺的測序，遵循製造商的協定。
序列生物資訊學分析
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会计分析
在指定时间点，使用95%置信水平的Fisher精确度PERMANOVA分析，比较α多重性检验和β多重性检验的结果。我多次使用Bonferroni校正，因此避免了此类情况（拒绝真实性）。在α水平为0.05的条件下，哺乳期母亲与孕妇之间的相关性为p≤0.01，母乳喂养母亲与非哺乳期母亲之间的相关性为p≤0.005。
