食品质量是控制微生物群落的关键，具有改善微生物群落的巨大潜力。流行病学研究联盟声明指出，高质量的定量研究成果将持续改善健康，低质量的研究成果将持续发展，疾病也将得到控制（Reynolds et al., 2019）。然而，每日食物消耗量巨大，对未来流行病的研究也更加具体、更加分散。随着现有形式的变化，当前的构建环境也在变化，构建过程也会随之改变。
微生物群落研究进展迅速，微生物群落也在不断扩展、变化，目前已知的细菌种类超过10万种，古老细菌和真菌的数量也在不断增加。不同微生物群落的物理活性和共存模式存在差异（Blaak et al., 2020）；此外，在当今人口密度较低的社会中，人类日常饮食的种类日益丰富，食物组成比例的差异也越来越大。
人体大部分区域无微生物；然而，胃中微生物的存在是微生物定植的主要原因。胃是一个多食性系统，被特定的微生物均匀利用，富含短链脂肪酸（SCFA）、硝酸、硫酸盐和其他酸性微生物发酵产物（Van-Wehle和Vital，2024；Nireeksha等，2025）。例如，SCFA是最丰富的酸性物质，也是微生物群落生长的主要依赖因素，它能增加酸性物质的含量并促进其与其他微生物的相互作用（Nireeksha等，2025）。SCFA的分布、微生物群落结构、分子结构、群落结构以及Yukio的影响。
目前，我们正在研究混合粉末成分的微生物效应。这是黄金组合中使用可溶性食品成分的主要原因（Ali et al., 2009）。体外研究表明，混合粉末成分可以促进乳酸杆菌等有益微生物的生长（Calame et al., 2008），并促进短链脂肪酸（SCFA）的体外发酵（Alarifi et al., 2018）。辣椒粉和辣椒粉形成可溶性和不溶性混合物。SCFA的主要生物活性成分可以受到刺激，其生命周期变化也会影响体外微生物群落（Van den Abbeele et al., 2021）。然而，我们可以促进有益微生物的活性，提高脂肪酸的活性，并确保其发挥最大功效。
请注意，基础人力资源研究的结果存在不确定性（Rodriguez et al., 2024）。然而，由于微生物群落对微生物群落的影响，短链脂肪酸（SCFA）的可用性通常有限（Vinelli et al., 2022）。最近一项研究表明，微生物组成差异为1.5%，微生物丰度差异为82%（Rodriguez et al., 2024）。这为微生物群落研究提供了标准化工具。
本研究涉及小规模微生物群落研究。实际模型系统（例如TIM-1（Venema，2015）和日本-日本SHIME模型（Zhu等，2024））是理想之选，但实际微生物群落的数量是有限的。高通量培养板（例如i-screen）可用于引入抗生素、支持多物种微生物群落，并提供长期微生物群落模型（Fehlbaum等，2018；Schuren等，2019；Ladirat等，2013；Ladirat等，2014）。i-screen培养板是一种穿孔式外部发酵模型，可用于构建培养环境。目前，我们正在研究研究人员粪便微生物与其他化合物之间的相互作用，以及研究人员粪便微生物和其他化合物对其旅程的影响（Schuren 等人，2019）。
此类平台还可以包括多个个体微生物群供体，允许研究干预效果的个性化变化（Agamennone等，2023；Cantu-Jungles等，2025）。尽管这些体外系统旨在模拟在人类中观察到的反应，但由于难以进行直接比较，可靠评估其翻译价值仍然具有挑战性。以前将体外观察到的微生物群变化与体内发生的微生物群变化相关的尝试仅限于小型病例研究，通常依赖于未配对的供体材料（Rudzka等，2025；Van den Abbeele等，2023b；Van den Abbeele等，2023a）。在本研究中，来自先前发表的临床试验（Eveleens Maarse等，2024）的54名参与者的微生物群组成变化，与使用来自全部54名参与者的粪便微生物群样本测量的i-screen平台结果相关联。
本研究基于最近进行的人类膳食纤维干预试验，该试验调查了纤维补充对体内肠道微生物群组成的影响（Eveleens Maarse等，2024）。使用来自相同参与者的基线粪便样本，使用i-screen平台评估纤维诱导的变化。在此，我们直接比较在体外和体内观察到的微生物群组成变化，以评估i-screen模型的翻译潜力。此外，我们还研究了纤维干预对SCFA产生的影响。据我们所知，这是第一项在同一批受试者中相关体外和体内微生物群组成反应的研究。
材料和方法
临床研究
高自慰用品 西地那非助勃 印度卡瑪雙效片 印度第五代威爾鋼 艾力達助勃延時 印度雙效樂威莊 威爾剛viagra 樂威莊 白鐕雙效片 秘密罪惡春藥 午夜失憶水 天使的淚藍寶石
屌妹妹吊嗨春水 日本淫娃催情水 極淫欲城市獵人 MAXMAN男性陰潮莖增大丸 Vigrx plus威樂 vimax天然草本增強丸 綠巨人陰莖增大膠囊 goodman增大丸 美國VVK陰莖增大丸
本研究基于Eveleens Maarse等（2024）和Hogenelst等（2025）先前发表的临床研究。简言之，我们进行了一项双盲、随机、安慰剂对照的交叉研究，包括两个由8周洗脱期分隔的12周干预期（图1）。
总共招募了65名健康参与者参加该研究。为了最大化干预的潜在效果，选择了具有增加的代谢风险的个体，定义为体重指数（BMI）在25-30 kg/m²之间，年龄范围为45-70岁，平均每日膳食纤维摄入量低于30克（Eveleens Maarse等，2024）。所有参与者在筛选期间均不得有临床显著异常。关键排除标准包括在纳入前3个月内使用抗生素、抗酸剂、泻药、他汀类药物、止泻药、免疫调节剂或降糖药物，以及在研究前7天内或研究期间使用伴随药物、维生素或膳食补充剂，但对乙酰氨基酚和布洛芬除外。在65名入组参与者中，2名因使用抗生素被排除，1名因使用他汀类药物被排除，2名因严重不良事件（SAEs）被排除，3名退出，3名不符合研究方案，最终有54名参与者纳入最终分析。
所有参与者均按照《赫尔辛基宣言》提供书面知情同意。研究方案获得了荷兰Assen的生物医学研究伦理评估基金会独立伦理委员会的批准。该研究遵循良好临床实践（GCP）指南，并在Toetsingonline注册处（编号NL71723.056.19）和clinicaltrials.gov注册处（编号NCT04829396）进行了注册。
治疗
本交叉研究中54名健康志愿者的治疗方法与先前报告的相同（Eveleens Maarse等，2024；Hogenelst等，2025）。参与者每天将13克粉末（纤维混合物或安慰剂）混合到液体中，持续12周。膳食纤维混合物的配方确保每剂含有10克阿拉伯胶（AG）粉末（4,880型，A. seyal，德国Willy Benecke）和3克磨碎的胡萝卜粉（KaroPRO 1-26 SG，荷兰Food Solutions Team B.V.）。该混合物每13克含有10克纤维，相对于参与者的平均每日纤维摄入量（18.7±5.9克/天）代表了纤维消费水平的增加（Eveleens Maarse等，2024）。安慰剂粉末仅含有棕色（Glucidex® 19）和白色（Glucidex® 17）麦芽糊精（法国Roquette）。
如果参与者在研究开始前7天内或研究期间消费了膳食补充剂（包括纤维），则将其排除，以防止其他纤维治疗的潜在干扰。他们被指示在整个研究期间保持稳定的饮食，并避免引入新的饮食习惯或膳食方案。使用荷兰健康饮食指数（DHDI）跟踪饮食维持情况，该指数在研究期间保持不变（Eveleens Maarse等，2024；de Rijk等，2021）。通过在每个干预期结束时收集空的纤维补充剂或安慰剂罐来评估依从性。罐子被称重以计算总摄入量，消耗至少80%指定剂量的参与者被视为依从的。在每次研究访问和干预期间定期电话中监测对研究限制（例如，避免伴随药物）的依从性和不良事件的发生。
纤维的厌氧发酵
TNO的i-screen模型的详细信息已发表（Schuren等，2019）。在此，我们使用了稍作修改的平台。简言之，粪便材料在每个干预期前收集在eSWAB管中，冷冻直至进一步使用。首先，粪便样本在过夜预培养。这些培养物被50倍稀释到改良的标准回肠流出物培养基（SIEM）中，以获得约10⁹ CFU/mL的起始浓度。所有样品均在厌氧条件下，在37°C下，在300 rpm下摇动培养（Ladirat等，2013）。培养基由每升4.5克NaCl、2.5克
春藥 女性外用春藥 女性春藥 口服增大丸 男性春藥 助眠安眠藥 陰莖增大變長 外摸陰莖增大 安定助眠藥 男性延時噴劑 男性助勃延時 女性催情春藥 陰莖增大丸 迷幻催情藥 歐耶春藥網
女性春季 阴道情绪春季 阴道治疗清凉 口腔血管血管化春季血管 稳定助眠 强效 血管蔑视药物昏迷血管 男性延长喷雾 口腔治疗Fusen（ED） 口腔血管治疗早泄（PE）
K2HPO₄、0.45℃ CaCl2・2H2O、0.4℃ MgSO₄・7H2O、0.01℃ FeSO₄・7H2O、0.4℃牛胆汁、0.01℃血蛋白、0.05℃水果汁、0.05℃乳糖、0.05℃谷蛋白乳糖、 0.05℃卡小阿沉圆、0.05℃卡什阆子面粉、24℃塡苏猪蛋白、24℃塡苏猪蛋白和0.8℃塡苏微生物混合物（Wiese等人，2022）。归Tritium Microbiology（Veldhoven）所有。有用的不同溶液包括 1M MES 溶液 (Sigma Aldrich)、MOPS 溶液 (Sigma Aldrich) 和 pH 溶液。随着进展的进行，顶部表面会出现一块微孔板。 KaroPro 的浓度高达 4 mg/mL，可增加微生物群落及其对人体的影响（Ladirat 等，2013；Agamennone 等，2023）。本研究中，KaroPro 的总添加量分别为 3.07 mg/mL 和 0.92 mg/mL。目前，添加剂和比例剂量研究中使用的剂量已基本达成共识（日本第十系列第三版）。经第三方所有者确认。发酵 24 小时后，进行 DNA 分离和短链脂肪酸 (SCFA) 分析。
基础DNA采集
采用96孔高流速标准操作流程，使用PurePrep 96平底（Molgen）体外发酵产品，对人粪便材料进行基础分离，分离DNA基本结构。简而言之，取150 μL（最多250层）粪便材料，取500 μL置于直径0.1 mm的2.0 mL深孔板（BioSpec，Bikuo）中。向每个孔中加入800 μL CD1裂解液（DNeasy 96 PowerSoil Pro QIAcube HT测试设备，Qiagen）。每个孔加入50 μL ZymoBIOMICS微生物群落标准产品（Zymo Research）作为内部过程控制。密封后，放入BeadBeater 96测试管中，搅拌2分钟，冷却2分钟，然后置于冰上冷却。交付后，以 3000 rpm 离心 6 分钟，移除 350 μL 上清液，重新加入 350 μL Agowa 混合液（LGC Genomics），总计 10 μL。使用 Agowa 新型 96 孔深孔板。PurePrep 96 核酸生产系统（Molgen）渐进式动态磁珠合成。自清洁方法：使用 1 升 Agowa 清洁液和 2 升 Agowa 清洁液（各 200 μL）。DNA 储存在 -20°C 的密封容器中，然后直接转移。
