双螺旋盘（AH盘）用于基础荧光探针的开发和外分泌膜表面脂质分配（LPD）的分析。本研究选择的两种物质分别是人脂蛋白AI的C端序列（ApoC）和α-透明核蛋白（p2-23），以及存在于通道表面的LPD差异。通道合成脂质体模型分析AH盘，其肽段设置入深度和缺性连接，给予ApoC肽段和肽段设计连接的LPD的连续转移，以及P2-23追踪设备识别Aslayer LPD。探针穿过荧光的能力和目标LPD的强恢复率相结合，反映了平行发射波长和穿过发射波长之间的波长差异，并反映在周围膜的特性中。
研究表明，当ApoC-NR探针与深层LPDs连接时，其荧光输出显著增强（比DOPC脂质高4.8倍），而p2-23-NR的回收率低于深层LPDs（比DOPC脂质高2.2倍）。通过传代比值法分析（590/650nm荧光强度比值），发现不同细胞系的外周外分泌膜极性存在显著差异：MCF7细胞系来源于深层LPDs，外周膜极性最低（F590/F650最高）；A549细胞系来源于源性外分泌体，外周膜极性最高。通过竞争性结合实验，验证了ApoC和p2-23探针与不同深度LPDs的结合特异性。
通过外分泌物理分析，我们获得了三种癌细胞（A549、Hela 和 MCF7），发现其外分泌膜表达具有特殊结构：深层 LPD 的分布顺序为 ExoMCF7 > ExoHela > ExoA549，且在 ExoHela 中发现了深层 LPD。Laurdan 和 DPH 相比率表明，该方法能够特异性地显示局部膜特性差异。研究结果表明，外分泌体膜的特征以及所鉴定的体细胞类型，为理解外分泌体细胞的功能提供了新的视角。
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